《生物化学》实验教学指导.doc

1、生物化学实验教学大纲课程编号：课程名称：（生物化学/Biochemistry）课程总学时：72实验总学时：18实验课性质：（独立设课）适用专业：五年制中医、针灸推拿专业承担实验室（或教研室）：基础医学院生物化学教研室基础医学院西医综合实验室一、课程实验教学简介生物化学实验教学作为医学、药学、生物学及相关学科的必设环节,它应用化学的方法和手段来研究生物有机体的物质组成及变化。其作用是使学生在生化实验技术、仪器的使用、分析和解决问题能力等方面有所提高；同时使学生掌握一般生物化学实验中的实验原理和操作方法；在实验过程中可使学生的创新能力和综合素质得以提高，并结合理论课所学内容相应地安排实验课,力求实

2、验内容与理论教学内容相协调。二、课程实验教学的目的和基本要求生物化学是一门实验性学科，其所有知识均来自于实验。本课程着眼于学生学习和掌握生物化学课程的基本理论、基本知识以及实验技能，培养学生具有初步分析问题和解决问题的能力。生物化学实验教学以学生在实验室实践为主,发挥学生的主体作用，教师只作必要的实验原理和注意事项的讲解,并注意引导学生拓展所学的内容，通过实验内容的学习了解生物化学技术的原理和操作要点，提高学生的实践能力和创新能力。三、学生应掌握的实验技术和基本技能1熟练掌握以下各项生物化学实验的基本操作技能：各种常用玻璃仪器的洗涤和使用：滴管、吸量管、微量加样器的使用。离心机、分光光度计、紫

3、外检测仪、pH值试纸、层析系统、凝胶成像系统、摇床、水浴箱、电泳仪系统等的使用。各种试剂的配制：2掌握以下各项生化实验基本技术和基本原理蛋白质的颜色反应、比色分析法和紫外分光光度法测定蛋白质的含量。醋纤膜电泳和聚丙烯酰胺凝胶电泳分离血浆脂蛋白血液葡萄糖的测定方法。酶的性质以及酶促反应动力学有关方法（底物浓度、PH对反应速度的影响）。质粒DNA的抽提与鉴定的方法。3熟悉生物化学实验技术的有关理论分光光度法及比色分析法基本原理。离心理论。层析技术理论。电泳技术理论。核酸杂交、基因重组等部分分子生物学实验技术理论。生物大分子分离、纯化的一般实验设计相关理论 。实验误差、数据处理、有效数字相关理论。精

4、密度、标准差、变异系数、回收率概念及理论。四、实验项目名称、性质和学时分配序号实验项目名称实验性质学时数必做/选做01酶的性质验证性、应用性3必做02血糖测定（福林一吴法）验证性、应用性3必做03血清总胆固醇的测定（硫磷铁法）验证性、应用性3必做04转氨基作用（纸层析法）验证性、应用性、综合性3必做05酵母RNA的提取和鉴定验证性、应用性3选一06胍酚法提取纯化重组大肠杆菌核酸及琼脂糖凝胶电泳鉴定、紫外分光光度法鉴定及定量验证性、应用性、综合性307血清蛋白醋酸纤维薄膜电泳验证性、应用性3必做注：实验性质是指验证性、应用性、设计性、综合性、创新性实验等。五、各单项实验的具体内容和要求(包括实验

5、分组人数要求)：(一) 实验名称：酶的性质实验内容：1、酶的专一性2、PH对酶促反应速度的影响3、温度对酶促反应速度的影响4、激活剂对酶促反应速度的影响5、酶的竞争性抑制实验目的要求：1、掌握通过实验现象了解酶的性质的定性实验技能2、通过蔗糖酶和唾液淀粉酶的催化反应特点熟悉酶作用专一性原理3、通过pH和激动剂对唾液淀粉酶活性的影响加深理解酶促反应动力学理论4、通过丙二酸对琥珀酸脱氢酶的抑制加深理解酶的竞争性抑制作用理论(二)实验名称：血糖测定（福林一吴法）迅猴百度文库批量上传下载刷分全能助手软件 实验内容：1、制备无蛋白血滤液2、测血糖3、计算结果实验目的要求：1、 掌握血糖测定（福林一吴法）

6、的方法。2、 熟悉分光光度计的原理和基本操作方法3、 了解其他几种血糖测定方法的原理4、 通过血糖测定实验了解临床检测糖代谢是否正常的方法(三)实验名称：血清总胆固醇的测定（硫磷铁法）实验内容：1制备胆固醇的乙醇抽提液2比色法测定胆固醇标准应用液和乙醇抽提液的吸光度。三支，编号。3结果计算实验目的要求：1、 掌握血清总胆固醇的测定（硫磷铁法）的方法。2、 进一步熟悉分光光度计操作方法。3、 熟悉离心技术原理和操作方法。4、通过血清总胆固醇的测定实验了解临床检测血清总胆固醇的意义。(四)实验名称：转氨基作用（纸层析法）实验内容：1、大白兔肌匀浆的制备（由实验室准备室制备）2、转氨基反应3、氨基酸

7、的纸层析分析实验目的要求：1、掌握纸层析法分离分析氨基酸的方法2、通过实验熟悉转氨基作用的生化理论知识3、通过实验了解层析技术的原理和应用(五)实验名称：酵母RNA的提取和鉴定实验内容：1RNA的提取2RNA的鉴定实验目的要求：1、掌握碱法提取RNA的操作2、熟悉RNA鉴定的原理和方法3、了解分离提纯完整的RNA分子的方法及操作注意事项(六)：胍酚法提取纯化重组大肠杆菌核酸及琼脂糖凝胶电泳鉴定、紫外分光光度法鉴定及定量实验内容：1 过夜培养重组大肠杆菌。2 将组织块用匀浆器磨成匀浆。3 用异硫氰胍和重蒸平衡酚混合液抽提RNA。3用酚氯仿抽提纯化RNA。 4用无水乙醇沉淀RNA。5沉淀TE溶解后

8、做鉴定定量。6. 琼脂糖凝胶电泳7. 应用紫外分光光度计定量 实验目的要求1、掌握胍酚法提取纯化完整RNA的方法，掌握琼脂糖凝胶电泳的方法以及对核酸分子大小、完整性、纯度的判断方法，掌握紫外分光光度法定量双链DNA、单链DNA、RNA的原理与方法2、熟悉苯酚抽提的原理和操作3、了解防范RNase降解RNA的方法(七)血清蛋白醋酸纤维薄膜电泳实验内容1血清蛋白醋酸纤维薄膜电泳。2血清蛋白染色。实验目的要求1、掌握醋酸纤维薄膜电泳分离分析血清蛋白的原理和方法2、熟悉电泳技术的原理和应用3、通过实验了解测定血清蛋白含量的临床意义六、考核（考试）方式：1. 靠勤； 2. 实验报告：每次实验上交实验报告，学期末汇总平均分数。七、实验教材与参考书：参考书：王继峰主编.生物化学2007年1月第2版，中国中医药出版社出版教材：林海波主编.生物化学分子生物学实验指导，2002年7月第2版，广州中医药大学生物化学教研室主编 编写：谭宇蕙审阅： （教研室主任签字） 日期： 审定： （教学副院长签字） 日期：