肿瘤标志物联合检测在胃癌诊断中的应用价值.doc

1、河南科技大学毕业论文肿瘤标志物联合检测在胃癌诊断中的应用价值摘 要目的：研究血清癌胚抗原（CEA）、糖类抗原199、（CA-199)、糖类抗原72-4（CA72-4）、糖类抗原（CA50)联合检测在胃癌诊治中的临床价值，以筛选理想的血清肿瘤标志物组合，提高临床诊断胃癌的灵敏度、诊断率。方法：应用放射免疫分析（RIA）法和化学发光免疫分析法测定100例胃癌患者和46例非胃癌患者的血清中CEA、CA199、CA724、CA50四种肿瘤标志物的含量，并分析单个肿瘤标志物和五种标志物联检对胃癌的敏感性和特异性结果：胃癌组CEA、CA199、CA724、CA50水平明显高于非胃癌组(P005)、胃癌患者

2、血清水平，CEA、CA199、CA724、CA50阳性表达率分别为52.00、45.00、47.00、34.00。联合检测阳性率为CEA+CA199=79%、CEA+CA724=76%、CEA+CA50=63% CA199+CA724=58% CA199+CA50=50% CA724+CA50= 51%、CEA+CA199+CA724=88%、CEA+CA724+CA50=86% 、CEA+CA199+CA50= 83%、CA199+CA724+CA50=80% CEA+CA199+CA724+CA50=92%。两者联合检测较单一指标阳性率高，三者联合检测普遍较两者检测阳性率高，四者联合检测普

3、遍较三者联合检测阳性率高(PO05)。将四种肿瘤标志物联合测定，可使敏感性提高到92.00，特异性达71.74， 结果经统计学处理呈显著性差异(P005)，联合检测优于单项检测。结论：血清中癌胚抗原(CEA)、糖类相关抗原50(CA-50)和糖类相关抗原199(CAl9-9)、糖类相关抗原724(CA724)四种血清肿瘤标志物在胃癌诊断中具有较高的辅助诊断价值，四项标志物联合检测有助于提高胃癌诊断的灵敏度及预后判断。关键词：胃癌，肿瘤标志物，联合检测，诊断49THE DIAGNOSTIC VALUE OF COMBINED DETECTION WITH FOUR TUMOR MAKER FOR

4、 GASTRIC CANCERABSTRACTObjective:To research the clinical significance of serum tumor markers CEA、CA199、CA724、CA50 in the diagnosis of gastric cancer ,to filter the ideal serum tumor markers combination .SO as to improve the sensitivityand diagnosis ratio for gastric carcinomaMethods:The serum conce

5、ntration of tumor makers CEA,CA199,CA724,CA50 in the serum of 100 patients with gastric cancer and 46healthy individuals were measured by radioimmunoassay(RIA) and electrochemiluminescence method Meanwhile，analyzing the difference of a single tumor markers and the combined detection of four tumor ma

6、rkers in sensitivityand specificity for the gastric cancerResults:The serum levels ofCEA,CA125,CA199,CA724 in patients with gastric cancer were obviously higher than those in the control group It has statistical significance(P005).The respective positive expression rates of CEA,CA199,CA724,CA50 in s

7、umer are 52.00、45.00、47.00、34.00The positive rates of the unite test of index are as follows,CEA+CA199 is 79.00%、CEA+CA724 is 76.00%、CEA+CA50 is 63.00% CA199+CA724 is 58.00% CA199+CA50 is 50.00% CA724+CA50 is 51.00%、CEA+CA199+CA724 is 88.00%、CEA+CA724+CA50 is 86.00% 、CEA+CA199+CA50 is 83.00%、CA199+C

8、A724+CA50 is 80.00% CEA+CA199+CA724+CA50 is 92.00%。 The positive rates of the unite test of four indices is 92.00 percent, which is obviously higher than the positive rates of the singie index tests.percentCombined detection of five tumor markers could improve the sensitivity rate to71.74 percent，th

9、e specificity rate to 92.00 percentThe results has significant difference(P2cm）腺瘤型息肉；3，残胃炎，常在术后15年以上发生癌变，可能与胃酸分泌低，有利于细菌繁殖，易产生大量亚硝酸盐有关；4，伴有恶性贫血的萎缩性胃体胃炎；5，少数胃溃疡病人。1.1.2胃癌的分类 根据国内以往统计，胃腺癌的好发部位依次为胃窦部（58%）、贲门（20%）、胃体（15%）、全胃或大部分胃（7%）。根据胃癌的进程可分为早期胃癌和进展期胃癌 早期胃癌是指病灶局限且深度不超过黏膜下层的胃癌，不论有无局部淋巴结转移。内镜下早期胃癌可表现为小的息

10、肉样隆起或凹陷（插彩图）。癌灶直径小于1cm者称小胃癌，小于0.5cm者称微小胃癌。早期胃癌的分型由日本内窥镜学会1962年首先提出，并沿用至今：I型(隆起型或息肉型)：病灶多成息肉样隆起，隆起高度高于正常粘膜的2倍以上，基底宽无蒂，表面粘膜发红或苍白，也可出现出血斑及糜烂：II型(表面型或浅表型)：癌灶多平坦，不形成明显的隆起或凹陷；III型(凹陷型或溃疡型)：粘膜溃烂较深，底部多覆有坏死物，边缘多不规整或呈结节状改变，一般不超过粘膜下层，可见聚合黏膜皱襞的中断或融合。其中II型根据凹陷的深度又可分为三个亚型：II a(浅表隆起型)：病灶略高于正常粘膜，一般不大于5mm，表面粘膜平整； II

11、b（浅表平坦型)：病灶与周围粘膜分界不清，高度略同，主要表现为粘膜粗糙不整或不平坦，多成颗粒状； IIC(浅表凹陷型)：较常见，病灶多成浅溃疡，凹陷深度不超过5mm，底粗糙不平或覆白苔。若病灶有两种形态，则称为混合型3。 II C发病率最高占80以上D1。 进展期胃癌深度超过黏膜下层，已浸入肌层者称中期，侵及浆膜或浆膜外者称晚期胃癌。进展期胃癌在临床上较早期胃癌多见，大多可以从肉眼观察作出拟诊，肿瘤表面多凹凸不平，糜烂，有污秽苔，活检易出血；也可成深大溃疡，底部覆有污秽灰白苔，溃疡边缘呈结节状隆起，无聚合皱襞，病变处无蠕动。大体形态类型仍沿用Borrmann提出的分类法型（息肉样癌）：瘤肿呈息

12、肉样明显突出粘膜面，表面可有糜烂或溃疡，与周围组织分界清楚。此型不多见。型（溃疡型癌）：癌肿呈溃疡型，溃疡周围有明显高起的环堤，边界较清楚，周围粘膜无肉眼可见的癌浸润现象，此型常见型（溃疡浸润型癌）：癌肿呈溃疡型，在癌性溃疡的四周或某一处有肉眼可见的癌浸润向外伸延，并与正常粘膜分界不清。此型最常见。型（弥漫浸润型病）：癌组织发生于黏膜表层以下，在胃癌内向四周弥漫浸润扩散，同时伴有纤维组织增生，此型少见。病变如累及胃窦，可造成狭窄；如累及全胃，可使整个胃壁增厚、变硬，称为皮革胃。1.2胃癌的临床表现及诊断1.2.1胃癌的临床表现早期胃癌70%以上无明显症状，随着病情的发展，可逐渐出现非特异性的、

13、醋似胃炎或胃溃疡的症状，包括上腹部饱胀不适或隐痛、泛酸、嗳气、恶心、偶有呕吐、食欲减退、黑便等。 浙江中医药大学附属第一医院外科余建法进展期胃癌见上腹疼痛，常为咬啮性，与进食无明显关系，也有类似消化性溃疡疼痛，进食后可以缓解。上腹部饱胀感、沉重感、厌食、腹痛、恶心、呕吐、腹泻、消瘦、贫血、水肿、发热等。贲门癌主要表现为剑突下不适，疼痛或胸骨后疼痛，伴进食梗阻感或吞咽困难；胃底及贲门下区癌常无明显症状，直至肿瘤巨大而发生坏死溃破引起上消化道出血时才引起注意，或因肿瘤浸润延伸到贲门口引起吞咽困难后始予重视；胃体部癌以膨胀型较多见，疼痛不适出现较晚；胃窦小弯侧以溃疡型癌最多见，故上腹部疼痛的症状出现

14、较早，当肿瘤延及幽门口时，则可引起恶心、呕吐等幽门梗阻症状。癌肿扩散转移可引起腹水、肝大、黄疸及肺、脑、心、前列腺、卵巢、骨髓等的转移而出现相应症状。1.2.2胃癌的诊断早期胃癌症状隐匿，故诊断困难，需借助特殊检查帮助确定诊断。临床上用来诊断胃癌的辅助检查方法有：1、 体格检查：可能有左锁骨上淋巴结肿大（是进入血液全身播散的最后守卫淋巴结）、上腹包块、直肠指检发现盆腔底部有肿块（癌细胞脱落至盆腔生长）。 2、实验室检查：早期血检多正常，中、晚期可有不同程度的贫血、粪便潜血试验阳性。目前尚无对于胃癌诊断特异性较强的肿瘤标记物，CEA、CA50、CA72-4、CA19-9、CA242等多个标记物的

15、连续监测对于胃癌的诊疗和预后判断有一定价值。 3、影像学检查： （1）上消化道X线钡餐造影：有助于判断病灶范围。但早期病变仍需结合胃镜证实；进展期胃癌主要X线征象有龛影、充盈缺损、粘膜皱襞改变、蠕动异常及梗阻性改变。 （2）增强型CT（电脑断层扫描设备）可以清晰显示胃癌累及胃壁的范围、与周围组织的关系、有无较大的腹腔盆腔转移。 （3）MRI（磁共振显像）在判断癌灶范围方面可提供另一种信息，CT造影剂过敏者或其他影像学检查怀疑转移者可使用此检查，MRI有助于判断腹膜转移状态，可酌情使用。 （4）PET-CT扫描（正电子发射断层扫描设备与电脑断层扫描设备合二为一的设备）对判断是否是胃癌约有80%以

16、上的准确性（印戒细胞癌和粘液腺癌准确性约50%），并可了解全身有无转移灶，没有痛苦，但费用昂贵。 术前显影的胃癌术后可靠此方便地追踪有无胃癌复发。 （5）胃镜或腹腔镜其超声： 可测量癌灶范围及初步评估淋巴结转移情况，有助于术前临床分期，以便选择疗法及判断疗效。 胃镜病理活检（取活组织进行病理检验）明确为胃癌者，可作胃镜镜超声检查确定其是否为早期或进展期，单纯胃镜检查有时难以区分胃癌的早晚期。 胃镜发现可疑胃癌但病理活检又不能确诊，可用超声内镜判断而不需要病人反复胃镜检查活检。 术前各种影像检查怀疑淋巴结广泛增大者或怀疑侵犯重要脏器可能不能切除者，若条件许可，可行腹腔镜超声检查了解是否癌灶与脏器

17、间有界限以便切除、淋巴结是否转移融合到无法切除的程度、哪些淋巴结有可能转移。 4、内窥镜检查： 胃镜检查，可发现早期胃癌，鉴别良恶性溃疡，确定胃癌的类型和病灶范围。发现胃溃疡或萎缩性胃炎，要病理活检评估其细胞异型增生程度，重度异型增生（不典型增生）者需要按早期癌对待。 腹腔镜检查，有条件的医院可通过此检查达到类似剖腹探查的效果，可细致了解癌灶与周围情况，尤其是可发现腹膜有无广泛粟粒状种植转移的癌灶，这是其它检查难以发现的。一旦有此种情况，则手术疗效很差，若患者高龄且身体很差，则可考虑放弃手术而试用其它疗法。1.3肿瘤标志物在胃癌诊治中的应用1.3.1肿瘤标志物的概述从1846年Bence-Jo

18、nes发现本周蛋白作为多发性骨髓瘤的实验室诊断依据以来，肿瘤标志物的研究已有100多年的历史，但直到1963年Abelev发现甲胎蛋白（AFP）、1965年由Gold等人发现癌胚抗原（CEA），以后，肿瘤标志物才被学术界所关注，肿瘤标志物测定才在临床广泛应用。肿瘤标志物是随着肿瘤基础理论的发展、新检测技术的诞生而大量涌现的，是随着临床对肿瘤早期发现、早期诊断的重视而被重新认识。肿瘤标志物（TM）是指肿瘤组织和肿瘤细胞由于癌基因或抗癌基因和其他肿瘤相关基因及其产物异常表达所产生的抗原和生物活性物质，而在正常组织或良性疾病时有一定程度表达或产量甚微，它反映了癌的发生和发展过程及肿瘤相关基因的激活或

19、失活程度。除少数肿瘤外，大部分肿瘤往往会有多个肿瘤标志物阳性。一个特定的肿瘤，不同肿瘤阶段，不同的肿瘤细胞类型，不同的预后时，呈阳性的肿瘤标志物可能不尽相同：或相同的标志阳性率不同，增加了肿瘤标志物应用的复杂性。有的肿瘤标志物可在多种肿瘤呈阳性，称为广谱肿瘤标志物。肿瘤标志物来源广泛，习惯上按标志本身的性质，肿瘤标志物分为以下7类：1酶和同工酶类；2激素类；3胚胎抗原类；4特殊蛋白质类；5糖蛋白类；6癌基因类；7其他肿瘤标志。1.3.2肿瘤标志物在胃癌诊断中的应用因为肿瘤标志物是在肿瘤发生和增殖过程中，由肿瘤细胞生物合成、释放或是宿反应性的一类物质1，因此可用于指示肿瘤的存在。此外，在患者机体

20、中，由于肿瘤组织浸润正常组织，引起机体免疫功能和代谢异常，产生一些生物活性物质和因子，虽然这些物质的因子特异性低，但与肿瘤发生和发展有关，也可用于肿瘤的监测。我们通过测定血清中其存在或含量，对于肿瘤的辅助诊断、分析病情、指导治疗、检测复发或转移及判断预后等。 近几年来，由于分子生物学的迅猛发展，与胃癌相关的肿瘤标志物如CEA、CAl25、CAl99、CA724不断地被发现。癌胚抗原（CEA）、糖类抗原199、（CA-199)、糖类抗原72-4（72-4）、糖类抗原（CA50)都是有明确诊断意义的肿瘤标志物，其升高常出现在消化道癌症16。 1： CEA是在1965年由Gold等首先自人结肠组织中

21、发现。CEA属细胞表面的糖蛋白家族，是Mr150 000300 000的糖蛋白，是胚胎性致癌抗原，胎儿在妊娠2个月后由消化道分泌CEA，出生后这类抗原的产生即被抑制。正常组织分泌CEA的有：支气管、唾液腺、小肠、胆管、胰管、尿道和前列腺。在成人CEA主要是由结肠粘膜细胞分泌到粪便中，少量重吸收入血液。 大部分健康人群CEA血清浓度小于2.5ug/L。癌细胞分泌CEA则进入血液和淋巴，CEA分泌入胃肠道而失去极性。大约70%的直肠癌、55%的胰腺癌、50%的胃癌、45%的肺癌、40%的乳腺癌、25%的卵巢癌病人CEA升高。在20%-50%良性疾患者CEA也可适量升高，但在这些良性疾病中，CEA水

22、平仍保持在病理范围的低值部分，很少超过10ngml。CEA水平高低与肿瘤的大小及病情的早、中、晚期程、淋巴结或其他部位转移、预后等有关。而且与肿瘤的组织类型有关。CEA对腺癌最敏感，其次是鳞癌和低分化癌。当CEA比正常持续升高5-10倍，强烈提示恶性肿瘤特别是肠癌的存在。高水平的CEA（80ug/L）,可作为肿瘤已有转移的标志，因为CEA是一种细胞粘附分子，极易浸润和转移。在早期和局部的乳腺癌，CEA常在正常参考范围，一旦CEA升高，往往意味有转移。肿瘤治疗有效，CEA即行下降，如CEA水平又升高往往意味肿瘤的复发。一般说来，从CEA开始升高到临床有明显复发症状约5个月，这在90%的再手术的病

23、人身上得到了证实。在整个直肠癌治疗期间，CEA是一个有效的监视指标，是发现复发的理想指标，其敏感性高于X线和直肠镜。CEA还常用于监视胰腺癌、胃癌、肺癌、乳腺癌的治疗，早期局限的乳腺癌病人CEA应该是正常的，一旦升高表明有骨或肺转移。据不完全统计，有65%的小细胞肺癌病人CEA升高，所以CEA也是诊断和监视小细胞肺癌的有效工具。 CEA是一种广谱的肿瘤标志物。不是消化道的特异抗原，在其他系统肿瘤中也有较高的表达，但在消化系肿瘤中有较高的阳性率，据文献资料报道，CEA在胃癌患者血清中的灵敏度为13-357【2,4,5,6】，而随着检测方法由原来双抗体夹,SELISA法改为电化学发光法，灵敏度可提

24、高2个数量级，尤其对胃肠癌及胆管癌更具特异性【37】。因此，CEA对胃癌有一定的诊断价值。CEA也可与其它指标联合应用以评价胃癌的化疗疗效，如CEA水平下降范围在50以上或降至正常范围并持续4周以上可作为治疗有效指标，如治疗后持续增高提示预后不良【13】。 2： CA19-9是由Koprowski等【25】在1979年发现的，CA19-9抗原决定簇是唾液酸化2型乳酸岩藻糖。是肿瘤细胞神经节甘脂。存在于胎儿胃、肠和胰腺的上皮，在成人的胰、肝和肺中浓度较低，其为许多粘膜细胞的组成成分。 据文献报道2-6认为血清CAl9-9升高与肿瘤大小、淋巴结或肝脏转移、浸润深度、生存率及预后密切相关。CAl99

25、不具有器官特异性，胰腺、胆道、结直肠、胃等恶性肿瘤时升高，尤其以胰腺和胆管壶腹部癌的阳性检出率为最高【37】，各种癌症的阳性检出率分别为：胰腺癌99%、胆管癌67%、结肠癌61.5%、胃癌40%-50%、直肠癌30%、乳腺癌15%【1】。有报道说10%-20%的良性胰腺炎和胃肠道疾病CA19-9均可升高，但其值很少超过120kU/L。对于数千监测CA199阳性的患者，将其作为疗效观察和预后判断的指标是非常有意义的。若术后CA199仍居高不降或降而复升，均提示预后不好、肿瘤复发或转移（可作为治愈性手术后复发的早期检测指标，其阳性标示着着不良预后。），被认为是临床测胰腺癌和胃癌的有用标志物。CAl

26、9-9在胃癌中的应用曾经仅次于CEA。然而，自引进CA72-4，CAl9-9的应用又次于CA72-4，推荐与CEA和CA724联合应用于胃癌的诊断。3： CA72-4属黏蛋白类癌胚抗原，是1981年Colcher等用乳腺癌肝转移的癌细胞膜成分免疫小鼠，所得的肿瘤糖蛋白抗原，含有两种抗体：B72.3是抗乳腺癌肝转移细胞株单抗，CC49的抗原来自直肠腺癌株。主要存在于人腺癌组织中。它存在于8595的胃、结肠、胰腺、肺和卵巢的肿瘤中，不存在于良性肿瘤、渗出物或正常人组织内【8】。CA72-4以其对于肿瘤的高度特异性为特征，是诊断胃肠道和卵巢肿瘤的重要标志物，其升高可见下列情况：3.5%的健康人、6.

27、7%的胃肠道病、40%的胃肠道癌、36%的肺癌和24%的卵巢癌。对胃癌有较高的敏感性，胃癌患者血清中CA72-4阳性率为18.659.4，其血清中水平高低与肿瘤大小、转移、分期及预后等有关【7,9-11】口.在胃癌的TM检测中，CA724较之CEA和CA199有更高的敏感度。英国学者研究结果显示：在病程不同分期及与肿瘤的浸润和淋巴结的转移过程中，CA724检测较之CA199更有意义，既与病程的临床分期呈正相关。上海华山医院以CA724、CA199和CEA联合测定诊断胃癌符合率为86.2%。国外除了用于胃癌的诊断外，更常用于预后判断和疗效观察。国外学者研究发现，在正常人和非肿瘤病人的血清中极少出

28、现CA724，在良性胃癌患者中的异常检出率仅0.7%.因此，其血清值可灵敏的反应肿瘤的存在，并适用于肿瘤的追踪观察。临床实际工作中,因联合检测对胃癌的特异性、敏感性较好，并且相对价格低廉，所以被广泛应用。4：CA50是1983年发现的，和CA19-9有很小差别，CA50来自抗直肠腺癌细胞系抗体，CA50抗体可识别含两个糖类的抗原决定簇，这一抗原在血清中存在的形式是糖蛋白，是去岩藻糖基的CA19-9，唾液酸化的I型乳糖系四糖，在组织中的存在形式是神经节甘脂。CA50主要识别上皮细胞癌中唾液酸基，这一抗原也可为CA19-9所识别。CA50仅存在与肿瘤组织中，正常组织不产生.其升高最多见于消化道癌症

29、。其阳性率如下：食管癌41%-71%，胃癌41%-71%，胆管癌58-70%，肝癌14%-78% 。CA50诊断胰腺癌阳性率最高达80%-97%1。 。有人认为CA19-9和CA50有互补作用，同时测定可以提高检测的特异性和敏感性。CA50比较常用于恶性肿瘤的普查和辅助诊断。若能有选择的与其它TM联合检测则更有助于判断肿瘤的部位同时提高阳性检出率。1.4肿瘤标志物在胃癌诊治研究中的问题与展望理想的肿瘤标志物有下列特点：(1)高度敏感性，能早期检测出肿瘤患者；(2)高度特异性，能准确鉴别肿瘤和非肿瘤患者；(3)高度器官特异性，有利于肿瘤发生部位的定位；(4)血清水平的高低与肿瘤临床分期、进展程度

30、相关，有利于判断患者预后；(5)半衰期短，能反映肿瘤生长情况的动态变化，能监测治疗效果、复发和转移等。然而经过多年的研究探索，迄今仍尚未发现特异性的胃癌肿瘤标记物，但多项实验结果显示采用两种或多种肿瘤标志物联合检测，较单项检测更有利于提高胃癌的早期诊断率、增进疗效、判断预后和检出复发。因此，更多的研究将着重于肿瘤标记物联合检测；另外，随着分子生物学技术不断发展，将会出现新的肿瘤标志物，某些分子水平的检测如基因的多态性、基因谱等有可能用于诊断肿瘤，并早期监测肿瘤的发生及预后的判断。第二章 材料与方法2.1研究对象胃癌患者组：选取在南阳市第一人民医院及门诊确诊为胃癌的患者100人，其中男51例，女

31、44例，年龄3975岁，平均55.2岁。入组病例均送病理组织学检查并出具报告，所有病例均经病理学确认为原发性胃癌（管状腺癌、乳头状腺癌、粘液腺癌、低分化腺癌等）。所有100例病人取血前均无化疗、放疗及免疫治疗史健康对照组：选取本院进行健康体检者46人，且排除胃癌及引起CEA、CA50、CA199、CA724等指标改变的疾病。其中男20例，女23例，为排除年龄因素影响，选取与胃癌组接近的平均年龄为56.8岁。2.2所用试剂CEA由北京北方生物技术研究所提供的碘【125I】癌胚抗原免疫放射分析药盒：ICEA标准品、I-Anti-CEA、ICEA包被管、ICEA质控血清CA199、CA724、CA5

32、0由深圳市新产业生物医学工程有限公司提供的相应试剂盒：磁微粒溶液、发光标记物、荧光素标记物、低点校准品、高点校准品碘伏2.3主要仪器及统计分析软件一次性使用无菌注射器压脉带一次性使用人体静脉血样采集容器（分离胶/促凝剂）离心管中佳SC-04低速离心机HH-W600数显恒温三用水箱新产业MAGLUMI2000全自动磁微粒化学发光测定仪Beckman Coulter Access2全自动微粒子化学发光免疫分析系统中佳光电GC-1200Y放射免疫计数器微量移液器SPSS17.0统计分析软件2.4标本采集用一次性无菌注射器采集随机静脉血约5ml至采集容器中，。所有标本采集后立刻颠倒混匀，室温静置。离心

33、、分离血清部分，将血清部分分两管。之后3h内测定完毕。2.5检测方法CEA采用中佳光电GC-1200Y放射免疫计数器测定，其检测原理为免疫放射分析法，采用双抗体夹心法对病人血清、进行测定。即样品中的CEA与固相包被的抗体形成抗原-抗体结合物。I标记的另一株单克隆抗体与CEA抗原的另一个为点结合，从而在试管上形成抗体A-抗原B-I的结合物，试管经洗涤后，上面的放射性随样品中的CEA的浓度增加而增加，根据相应试管上的放射性，用已知标准CEA含量与对应结合率作图，既得标准抑制曲线。从标准曲线上查知对应结合率的待测样品中CEA的含量CA199、CA724、CA50均采用新产业MAGLUMI2000全自

34、动磁微粒化学发光测定仪检测，均应用化学发光免疫夹心法原理检测，为针对相应标志物的一株单克隆抗体标记ABEI，另一株单克隆抗体标记FITC。标本、校准品与ABEI标记的单克隆抗体，FITC标记的单克隆抗体及包被羊抗FITC抗体的磁微粒球混匀，形成抗原与ABEI标记的相应抗体和磁性微球包被的相应标志物单克隆抗体的免疫复合物，然后外加磁场沉淀，去掉上清液，用洗液清洗沉淀复合物3次，直接进入标本测量室，仪器自动泵入发光底物1和2，自动监测3秒钟内发出的相对强度。相应肿瘤标志物浓度与相对强度成一定的比例关系，测定仪自动拟合计算相应标志物的浓度。所有操作步骤严格按照操作规范执行四种肿瘤标志物的临界值根据试

35、剂盒和参考文献确定，其阳性值分别是：CEA 5.095ng/ml CA19-9 37IU/ml CA72-4 6IU/ml CA50 10IU/ml。2.6统计学方法所有数据均以xs表示，采用SPSS17.0统计软件进行单因素方差分析，并对每组的均数及标准差等统计量进行描述；然后用t检验的方法将实验组的各项指标与对照组相比；再根据各组的测定指标对CEA与CA199、CA724和CA50的关系进行线性回归分析，并建立线性回归方程。第三章 结果与讨论3.1实验结果3.1.1胃癌组与正常对照组血清肿瘤标志物水平比较 胃癌组血清中的CEA、CAl9-9、CA72- 4、CA50水平明显高于正常对照组(

36、P0.5）表1：胃癌组与正常对照组血清肿瘤标志物CEA、CA19-9、CA72-4、CA50水平变化化(xs）项目 对照组n=46 患者组n=100 CEA（ng/ml） 3.10.2 37.825.6CA19-9（IU/ml） 14.57.3 7558.7CA72-4（IU/ml） 4.21.3 21.744.6CA50（IU/ml） 6.134.2 16.427.02注：1)患者组与正常组CEA相比：pO05 2)患者组与正常组CAl9-9相比：P0.05 3)患者组与正常组CA72-4相比：pO05 4)患者组与正常组CA50相比：pO053.1.2单项血清肿瘤标志物 CEA、CA19-9、CA72-4、CA50检测胃癌的灵敏度和特异性 四种血清肿瘤标志物单项使用检测胃癌的灵敏度以CEA（52%）最高，其次为CA72-4（47%）、CA19-9（45%）、CA50（34%）。特异性以CA50(93.48%)最高，其次为CA72-4（89.13%）、CA19-9（84.78%）、CEA（82.61%）。详见表2表2：单项血清肿瘤标志物检测胃癌的灵敏度和特异性肿瘤标志物 灵敏度（%） 特异性（%）CEA 52%