兽医微生物简答、论述.doc

1、第一章 细菌部分1细胞壁的主要功能；答：维持菌体的固有形态，保护细菌抵抗低渗环境；与细胞内、外物质效换有关，细胞壁有许多微孔，可使水和小分子物质自由通过，并阻留大分子物质，它与细胞膜共同完成细胞内、外物质交换；细胞壁为表面结构，携带多种决定细菌抗原决定簇；与细菌的致病性有关，革兰氏阴性菌细胞壁上的脂多糖具有内毒素作用，革兰氏阳性菌的磷壁酸、A群链球菌的M蛋白介导细菌对宿主细胞的黏附；2简述革兰染色的原理、主要步骤,结果及其实际意义?答：原理：G+菌细胞壁结构:较致密,肽聚糖层厚,脂质少,立体网状结构紧密，酒精不容易透入并可使细胞壁脱水形成一层屏障,阻止结晶紫-碘复合物从胞内渗出。 G+菌等电点

2、(PI2-3):比G+菌(PI4-5)低,在相同pH染色环境中,G+菌所带负电荷比G-菌多,结合带正电荷的碱性染料少，故与带正电荷的结晶紫染料结合较牢固,不容易脱色。 G+菌体内有核糖核酸镁盐与多糖复合物。(2)革兰染色的方法:细菌标本固定后,先用结晶紫初染（1min）,再用碘液媒染（1min）,使之生成结晶紫-碘复合物,然后用95%酒精脱色30s ,最后用稀释的复红复染1min。可将细菌分成2类,不被酒精脱色仍保留紫色者为革兰阳性菌;被酒精脱色后复染为红色者是革兰阴性菌。(3)用途:细菌形态鉴定、菌种鉴定(4)意义:鉴别细菌，革兰氏染色可将细菌分为革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌两大类；致病性有关

3、，大多数革兰氏阳性菌以外毒素为主要致病物质，而革兰氏阴性菌主要以内毒素致病，二者致病机制各不相同；选择抗菌药物，大多数革兰氏阳性菌对青霉素、头孢菌素、龙胆紫等敏感，大多数革兰氏阴性菌对氨基糖苷类抗生素，如链霉素、庆大霉素等敏感3试述细菌生长发育的条件。答：细菌生长繁殖的条件是：营养物质、酸碱度、温度、气体、渗透压；营养物质：所需营养物质主要有水分、碳源、氮源、无机盐和生长因子。酸碱度：大多数病原性细菌最适PH为7.2-7.6。此外根据不同细菌所需而选择不同的酸碱度。温度：各类细菌对温度的要求不同，根据细菌对温度的适应范围,可将细菌分为三类，即嗜冷菌、嗜热菌、嗜温菌。大多数细菌的最适生长温度是3

4、7.气体：细菌生长繁殖需要的气体主要是氧和二氧化碳。根据细菌对分子氧的需求（呼吸类型）包括：专性需氧菌、微需氧菌、专性厌氧菌、兼性厌氧菌。渗透压：一般培养基的渗透压和盐浓度对大多数细菌来说是安全的。4细菌生长曲线各时期的特点： (1)迟缓期:细菌被接种于培养基后,对新的环境有一个短暂的适应过程。因细菌繁殖极少,故生长曲线平缓稳定,一般为14小时。此期细菌菌体增大,代谢活跃,为细菌进一步分裂增殖而合成充足的酶、能量及中间代谢产物。(2)对数期(指数期):此期细菌大量繁殖,活菌数以恒定的几何级数极快增长,持续几小时至几天不等,此期细菌形态、染色和生物活性都很典型,对外界环境因素的作用十分敏感,因此

5、,研究细菌的生物学性状以此期细菌为最好。(3)稳定期:该期细菌总数处于稳定状态,细菌群体活力变化较大。此期细菌死亡数与增殖数渐趋平衡。细菌形态、染色和生物活性可出现改变,并产生很多代谢产物如外毒素、内毒素、抗生素等。细菌芽孢一般在该期形成。(4)衰亡期:随着稳定期发展,细菌繁殖越来越缓慢,死亡细菌数明显增多,与培养时间成正比。此期细菌生理代谢活动趋于停滞,细菌形态呈现肿胀或畸形衰亡,甚至自溶。5细菌在培养中的生长现象：液体培养基：混浊生长、沉淀生长、菌膜生长；半固体培养基：沿穿刺线生长、由穿刺线向四周扩散呈放射状或去雾状生长；固体培养基：菌落大小、形状、颜色、边缘、表面光滑度、湿润度、透明度及

6、在血平板上的溶血情况等。6细菌人工培养的意义？答：细菌的鉴定：可用于研究细菌的形态、生理、抗原性、致病性、遗传与变异等生物学性状。传染性疾病的诊断：可鉴别细菌性疾病、并对分离的病原菌进行药敏试验，帮助临诊上选择有效药物进行治疗。分子流行病学调查：对细菌特异基因的分子检测、序列测定、基因组DNA指纹分析等。生物制品的制备：经人工培养获得的细菌可用于制备菌苗、类毒素、诊断用菌液等生物制品。饲料或畜产品卫生学指标的检测：通过定性或定量的方法对饲料、畜产品中的微生物污染状况进行检测。7动物体内正常菌群的分布：消化道：口腔中细菌较多；单胃动物胃中细菌较少，反刍动物胃中细菌较多；小肠中细菌较少、大肠细菌繁

7、多。呼吸道：鼻腔和咽部常有葡萄球菌、酵母菌等；咽喉及扁桃体中常有甲型链球菌、卡他球菌及致病性菌；支气管和肺泡是无菌的。泌尿生殖道：尿道外部有些细菌。8柯赫法则要点：特定的病原菌应在同一疾病中可见，在健康者不存在；此病原菌能被分离培养而得到纯种；此纯培养物接种易感动物能导致同样病症；自实验感染的动物体内能重新获得病原菌的纯培养。柯赫法则在确定细菌致病性方面有重要意义，特别是鉴定一种新的病原时。9 细菌具有致病性与那些因素有关？答：病原菌能否致病，与特定细菌型或本身的毒力、数量、侵入途径以及机体自身的免疫力、环境因素有关。细菌的毒力因子；与侵袭力相关的毒力因子包括：黏附或定植因子、侵袭性酶、型分泌

8、系统、干扰宿主的防御机制。粘附或定植因子通常是细菌表明的大分子结构，如菌毛（革兰氏阴性菌）、菌体表面的层蛋白、脂磷壁酸等（革兰氏阳性菌）。侵袭性酶多为胞外酶，主要有透明质酸酶、链激酶、胶原酶等。具有型分泌系统的细菌有：沙门氏菌、耶尔森菌、大肠杆菌、铜绿假单胞菌等干扰宿主的防御机制：细菌的荚膜、细菌表面的蛋白、蛋白酶、细胞内逃逸。此外还有毒素，包括内毒素和外毒素。细菌的数量、侵入途径和感染。一般细菌毒力越强，治病所需均量愈小；反之。各种病原菌都有其特定的侵入途径和部位。根据细菌侵入和机体的自身抵抗力的力量对比，机体表现出不同的感染状态，感染分为隐性感染、显性感染和带菌状态。机体自身的免疫力、环境

9、因素。10 内毒素和外毒素的区别；区别内毒素外毒素来源革兰氏阴性菌革兰氏阳性及部分革兰氏阴性菌存在部位细胞壁成分，裂解后释放活菌中释放或细菌溶溃后散出化学成分脂多糖蛋白质稳定性160，2-4小时破坏60-80，30分钟被破坏毒性作用全身性，致发热、腹泻、呕吐对机体器官有选择性的毒害作用，引起特殊的临床表现毒性程度较弱，很少致死高，致死性抗原性弱，刺激机体产生的中和抗体作用弱；甲醛处理不形成类毒素强，刺激机体产生抗毒素；甲醛处理脱毒形成类毒素11. 细菌感染的常用诊断方法细菌学诊断方法包括：常规细菌学诊断、血清学检测（免疫学诊断）、基因诊断常规细菌学诊断方法包括：细菌形态学诊断、分离培养、生化试

10、验、药物敏感性试验； 免疫学诊断包括：抗原检测、抗体检测 基因诊断包括：聚合酶链式反应、核酸杂交技术12消毒剂的作用机理：使菌体蛋白质变性或凝固。如醇类、酚类、醛类、重金属盐类等。干扰破坏细菌的酶系统和代谢。如酚类、表面活性剂、重金属盐类等。改变细菌细胞壁或细胞膜的通透性，使细胞质重要代谢物质逸出，胞外物质直接进入细胞内，并能破坏细胞膜上的氧化酶和脱氢酶，最终导致细菌死亡。如新洁尔灭、酚类、表面活性剂等。13影响消毒剂作用的因素：消毒剂的性质、浓度和作用时间；消毒剂的理化性质不同，对微生物的作用强弱也有差异。一般而言，消毒剂浓度越高，作用时间越长，杀菌效果就越好。温度和酸碱度；升高温度可提高消

11、毒剂的杀菌效果。细菌的种类、数量与状态；不同种类的细菌对消毒剂的敏感性不同。有机物。环境中有机物能够影响消毒剂的效果。14简述大肠杆菌的致病特点。答案:(1)普通大肠杆菌:引起化脓性炎症,是肠道正常菌群的组分。在寄居部位改变、局部或全身抵抗力降低时可发生化脓性感染。如伤口化脓、胆囊炎、败血症等。(2)急性腹泻产肠毒大肠杆菌(ETEC):是儿童和旅游者腹泻的主要病原体。可产生耐热肠毒素和不耐热肠毒素、定居因子。肠致病大肠杆菌(EPEC):是婴幼儿腹泻的主要病原菌,具有高度传染性,严重可导致死亡。主要在十二指肠、空肠和回肠上段繁殖而致病。致病物质是细胞毒素。肠侵袭性大肠杆菌(EIEC):多侵犯较大

12、儿童和成年人,引起类似菌痢的腹泻。主要侵入结肠黏膜上皮细胞生长繁殖,产生内毒素,引起炎症和溃疡。 肠出血性大肠杆菌(EHEC):可产生与志贺痢疾杆菌类似的毒素,引起出血性结肠炎。15 简述产肠毒素性大肠杆菌的分离鉴定程序。答案:取病料接种于麦康凯琼脂或伊红美兰琼脂,37培养24小时,挑选麦康凯琼脂上红色菌落,或伊红美蓝琼脂上中心暗蓝黑色并有金属闪光的菌落,进行纯培养。对获得的纯培养物进行生化鉴定接种TST琼脂(发酵乳糖或蔗糖使斜面和底层变黄,不发酵乳糖或蔗糖,仅发酵葡萄糖时,底层变黄,斜面变红)及常规的生化项目鉴定。血清型鉴定 应用抗O、K、H抗原标准血清进行血清学定型采用肠结扎试验或免疫学、

13、分子生物学方法对毒素进行鉴定16.布氏杆菌包括哪些种?主要感染哪些宿主动物?答案:种 感染动物马耳他布氏杆菌 绵羊、山羊、牛、猪等,也可感染人流产布氏杆菌 牛、骆驼、绵羊、鹿等猪布氏杆菌 猪 、鹿、兔、犬、马、啮齿动物等绵羊布氏杆菌 绵羊等沙林鼠布氏杆菌 沙林鼠等犬布氏杆菌 犬等 以上布氏杆菌均有可能感染人17 简述链球菌的主要致病物质及所致的疾病有哪些?答案:(1)致病物质:脂磷壁酸、M蛋白、侵袭性酶(链道酶、链激酶)、链球菌溶血素、致热外毒素。(2)所致疾病:引起脑膜炎、败血症和心内膜炎，化脓性感染、中毒性疾病,如猩红热、变态反应性疾病(风湿热几急性肾小球肾炎)第二章 病毒部分1 病毒颗粒

14、的基本结构如何？画出模式图。答案:病毒的基本结构是指所有病毒都具有的结构,包括核酸内芯和蛋白衣壳,两者合称衣壳体。有些病毒在核衣壳外面尚有囊膜包裹，又称为有囊膜病毒 (1) 病毒的核酸内芯:位于病毒体的最内部,它仅含有一种核酸即DNA或RNA。核酸构成病毒的基因组，为病毒的复制、遗传和变异等功能提供遗传信息。(2) 蛋白衣壳是包囊或镶嵌在病毒核酸内芯外面的蛋白质结构,由若干个衣壳亚单位即壳粒构成。每个壳粒含有1数个多肽。(3) 包膜或称囊膜:为包膜在某些病毒核衣壳外面的肥厚但较疏松的膜样结构,主要由类脂质和糖蛋白构成。含有包膜结构的病毒称为有包膜病毒。 病毒包膜的类脂质是宿主细胞的成分,有些病

15、毒从宿主细胞表面获得,如正粘病毒科、副粘病毒科病毒;有些病毒源于宿主细胞胞质内膜,如虫媒病毒;有些病毒则来源于宿主细胞核膜,如疱疹病毒。病毒包膜中类脂质使其病毒对脂溶性溶剂具有敏感性,并使其病毒对宿主细胞具有“种”特异性以及特定的侵入部位。 病毒包膜的粘蛋白,其中蛋白质由病毒自身合成,而碳水化合物成分源于宿主细胞。包膜的表面为粘蛋白或蛋白质构成的包膜子粒称为刺突,镶嵌于包膜的类脂质中。例如,正粘病毒科病毒包膜上的血凝素和神经氨酸酶二种刺突,均与病毒的致病性及免疫性密切相关。2持续性感染的原因：机体免疫功能弱，无力完全清除病毒，病毒在体内可长期存留；病毒存在于受保护的部位，可逃避宿主的免疫作用；

16、某些病毒的抗原性太弱，机体难以产生免疫应答将其清除；有些病毒在感染过程中产生缺损性病毒颗粒，干扰病毒的增殖，因而改变了病毒的感染过程，形成持续性感染；病毒基因整合在宿主细胞的基因组中，长期与宿主细胞共存。3 病毒的检测；病毒材料的采集：取适宜的组织病料、分泌物或粪便等，充分研磨，加入青、链霉素，4冰箱处理2-4小时或过认，离心取上清液。液体病料用棉试子蘸取，浸泡入含有2%犊牛血清和含青、链霉素的汉格氏液中，充分涮棉试子，反复冻融3-5次，离心后取上清液作为接种材料。病毒的分离和鉴定病毒的分离与培养：细胞培养、鸡胚和实验动物可用于病毒的分离和培养，细胞培养为最常见的方法，采用细胞培养病毒分离时，

17、应盲传3代，观察细胞病变。病毒的鉴定：病毒的形态学鉴定：可通过电子显微镜观察病毒的形态和大小。病毒血清学诊断：分离病毒后，可用已知的抗病毒血清或单克隆抗体，对分离毒株进行血清学鉴定，以确定病毒的种类、血清型和亚型。病毒感染的血清学试验有：病毒中和试验、血凝抑制试验、免疫染色技术、免疫荧光抗体技术等。病毒分子生物学诊断病毒感染的分子生物学技术有：基因组电泳分析、核酸杂交、聚合酶链式反应、酶切图谱分析、DNA芯片技术等。4 简述鸡新城疫病毒的分离鉴定程序。答案: 病料的采集和处理可采集病鸡呼吸道分泌物、脾脏、血液、脑组织,按1:5的比例加入灭菌的生理盐水或缓冲液, 用研磨器将组织研碎制成20%的悬

18、液, 反复冻融2-3次, 5000r/min离心20分钟,取上清,用灭菌滤器过滤除菌或加抗生素杀灭病料中杂菌 分离培养将处理好的病料经尿囊腔接种911日龄无母源抗体的鸡胚,37孵育,每天照蛋2次,弃除24小时内死亡胚,收集24 -96小时死亡胚,96小时内未死亡胚取出。 收集鸡胚尿囊液采用血凝试验检查是否有血凝活性,对有血凝活性分离物应用标准的抗新城疫病毒,采用血凝抑制血清学试验对病毒进行鉴定。确定为新城疫病毒后对病毒的致病性做进一步鉴定致病性试验。5 A型流感病毒为何容易引起大流行?答案:主要的原因是A型流感病毒的HANA容易发生抗原转变。构成HA,NA的大部分或全部氨基酸均可发生改变,出现

19、抗原性完全不同的新亚型。变异由量变积累为质变。当新的流感病毒亚型出现时,人群普遍对其缺乏免疫力,因而容易引起大流行,甚至世界大流行6 简述分离与鉴定流感病毒常用的实验室检验步骤。答案: 病料的采集和处理:可采集病鸡呼吸道分泌物、脾脏、血液、脑组织,按1:5的比例加入灭菌的生理盐水或缓冲液,用研磨器将组织研碎制成20%的悬液,反复冻融2-3次,5000r/min离心20分钟,取上清,用灭菌滤器过滤除菌或加抗生素杀灭病料中杂菌。 分离培养:将处理好的病料经尿囊腔接种911日龄SPF鸡胚,37孵育,每天照蛋2次,弃除24小时内死亡胚,收集96小时内死亡胚,96小时内未死亡胚取出。 收集鸡胚尿囊液采用

20、血凝试验检查是否有血凝活性,对有血凝活性分离物应用标准的抗禽流感病毒血清,采用血凝抑制血清学试验对病毒进行鉴定,确定为禽流感病毒后对病毒的致病性做进一步鉴定-致病性试验。第三章 免疫学部分1固有性免疫的组成：解剖屏障皮肤、粘膜；血脑屏障；血胎屏障。可溶性分子与膜结合受体补体；溶菌酶；乙型溶素；干扰素；抗菌肽；C-反应蛋白；膜结合受体；炎症反应：参与固有性免疫的细胞NK细胞；吞噬细胞等。2 请列表比较人工自动免疫与人工被动免疫的区别。答案:项目 人工主动免疫 人工被动免疫输入物质 抗原 抗体/淋巴细胞产生免疫力时间 慢(23周) 快(输注即生效免疫力维持时间 数月至数年 23周主要用途 预防 治疗或紧急预防